Identificación de antígenos inmunodominantes específicos en productos de excreción/secreción de larvas de toxocara canis | Identification of specific immunodominant antigens in secretion/ excretion products of toxocara canis larvae

Resumen

La toxocariasis es la infección producida por Toxocara canis y T. cati, parásitos de perros y gatos, respectivamente. El hombre es un hospedador accidental, al infectarse con los huevos de esos parásitos. Las larvas invaden vísceras o el globo ocular, produciéndose dos síndromes: larva migrans visceral y larva migrans ocular. El diagnóstico presenta dificultades debido a sintomatología inespecífica y que las larvas solamente pueden ser evidenciadas por biopsias. Los métodos inmunológicos son una alternativa, pero puede presentar reacciones cruzadas con otras parasitosis, por lo que en este trabajo se planteó la identificación de antígenos inmunodominantes específicos en productos de excreción/secreción de larvas de T. canis mediante la técnica de Western blotting. Para ello se estandarizó la técnica determinando diluciones y concentraciones óptimas de antígeno y reactivos y posteriormente se empleó la técnica utilizando sueros de individuos con toxocariasis, de individuos con otras infecciones parasitarias y de individuos sanos. Se obtuvo como concentración óptima de antígeno 10 µg/tira, y las diluciones 1/100 y 1/5.000 para el suero y conjugado, respectivamente. Se observó reconocimiento de bandas inmunodominantes de 26, 40 y 57 kDa sólo por los sueros de individuos con toxocariasis, no observándose reconocimiento ni en los sueros de pacientes con otras enfermedades parasitarias, ni en individuos sanos. Los antígenos de 26 y 57 kDa han sido descritos como específicos para el diagnóstico de toxocariasis, mientras que la banda de 40 kDa no había sido identificada anteriormente. La técnica de Western blotting permitió un diagnóstico sensible y específico de la toxocariasis humana.

Palabras clave: Toxocariasis, larva migrans visceral, larva migrans ocular, Western blotting.

ABSTRACT

The toxocariasis is the infection caused by Toxocara canis and T. cati, parasites of dogs and cats, respectively. Man is an accidental host, when is infected with eggs from these parasites. The larvae invade organs or the eyeball, producing two syndromes, visceral larva migrans and ocular larva migrans. The diagnosis presents difficulties due to non-specific symptoms and the larvae can only be evidenced by biopsies. Immunological methods are an alternative, but may have cross-reactions with other parasites. Due to limitations in the diagnosis of the disease, the main objective of this work was to identify the specific immunodominant antigens in excretion/secretion products of T. canis larvae, by Western blotting technique. The reaction conditions were standardized, by determining optimal antigen concentration and dilutions of reagents and sera. Subsequently, the standardized technique was performed using sera from individuals with toxocariasis, individuals with other parasitic infections and healthy individuals. The results showed that the optimal concentrations of excretory/ secretory antigen was 10 µg/strip, and dilutions of 1/100 and 1/5,000 for serum and conjugate, respectively. Recognition of immunodominant bands of 26, 40 and 57 kDa was observed only by sera from individuals with toxocariasis, while patients with other parasitic diseases and healthy individuals did not recognize any of these bands. Antigens of 26 and 57 kDa have been described as specific for the diagnosis of toxocariasis, while the 40 kDa band had not been previously identified. The Western blotting technique allowed a sensitive and specific diagnosis of human toxocariasis..

Key words: Toxocariasis, visceral larva migrans, ocular larva migrans, Western blotting.