Utilidad del bandeo cromosómico con la enzima alu i para la identificación de zonas metiladas en leucemias agudas | Utility of chromosome banding with alu i enzyme for identifying methylated areas in acute leukemias

Resumen

Las leucemias agudas son proliferaciones malignas de células hematopoyéticas inmaduras de tipo blástico, cuya acumulación progresiva se acompaña de una disminución en la producción de los elementos mieloides normales. La transcripción inactiva de genes supresores de tumores por la hipermetilación de islas CpG en regiones promotoras, ha sido un foco de interés de los investigadores como un factor causal en malignidades hematológicas. El propósito del presente estudio fue determinar regiones hipermetiladas en muestras de extendidos cromosómicos mediante la utilización de Alu I y relacionarlas con sitios de genes supresores de tumores asociados con leucemias agudas. En este sentido, se analizaron 30 muestras de médula ósea, 18 con diagnóstico

de Leucemia Mieloide Aguda y 12 con Leucemia Linfoide Aguda, a 12 de las cuales se les realizó cultivo celular. Los extendidos cromosómicos fueron teñidos con Giemsa, luego de ser previamente digeridos con la enzima Alu I. En los pacientes con leucemia mieloide aguda y leucemia linfoide aguda se observó que 16/18 (88%) y 12/12 (100%) presentaron regiones anormalmente teñidas, solo en cuatro y tres de las regiones metiladas observadas, en leucemia mieloide aguda y leucemia linfoide aguda, respectivamente, no se encontró asociación en la literatura con genes metilados, lo cual resultó altamente significativo (p < 0,01) en ambas patologías. Queda en evidencia la utilidad de esta técnica para la identificación de zonas metiladas, ya que las mismas han proporcionado el

fundamento y las bases moleculares para un mejor enfoque terapéutico dirigido con agentes demetilantes tanto en leucemias agudas como síndromes mielodisplásicos.

Palabras clave: Metilación, leucemia mieloide aguda, leucemia linfoide aguda, tinción cromosómica.

ABSTRACT

Acute leukemias are malignant hematopoietic cells of immature proliferations of the blastic type, whose progressive accumulation is accompanied by a decrease in the production of normal myeloid elements. Transcription of inactive tumor suppressor genes by hypermethylation of CpG islands in promoter regions, has been a focus of researchers as a causal factor in hematological malignancies. The purpose of this study was to determine hypermethylated regions of chromosomal spread samples using Alu I and relate these regions with sites of suppressor gene associated to acute leukemia tumors. From an analysis of a 30 bone marrow samples, 18 were diagnosed with Acute Myeloid Leukemia and Acute Lymphoid Leukemia, and 12 underwent cell culture. Chromosomal spreads were stained with Giemsa after being previously digested with the enzyme Alu I. In patients with acute myeloid leukemia and acute lymphoid leukemia it was observed that 16/18 (88%) and 12/12

(100%) had abnormally stained regions, single in four and three methylated regions observed in acute myeloid leukemia and acute lymphoid leukemia, respectively, no association was found in the literature with methylated genes, which was highly significant (p < 0.01) in both conditions. This shows the usefulness of this technique for the identification of methylated areas, since they have provided the foundation and the molecular basis for a better targeted therapeutic approach with demethylating agents, both in acute leukemias and myelodysplastic syndromes.

Key words: Methylation, acute myeloid leukemia, acute lymphocytic leukaemia, chromosomal staining.